Resum: els portadors ABC formen una gran família de proteïnes presents en tots els organismes vius. Aquestes proteïnes utilitzen l’energia subministrada per la hidròlisi ATP per transportar a través de les membranes biològiques de substàncies molt variades. Diverses proteïnes ABC són importants per a la salut humana. Per exemple, el defecte funcional de la proteïna CFTR provoca la mucoscidosi i la sobreproducció de proteïnes MRP1 s’associa amb els fenòmens de resistència als tractaments anti-tumorals. El llevat Saccharomyces Cerevisiae té una família de proteïnes (YOR1P, YCF1P, BPT1P, YBT1P, VMR1P, NFT1P) relacionada amb CFTR i MRP1. Aquesta família pot servir de model per a l’estudi de les proteïnes humanes. La primera part d’aquest treball de tesi es va dedicar a l’estudi bioquímic de la proteïna de llevats Yor1P. Hem fusionat yor1 amb un fragment d’ADN que codifica un pèptid poli-histidina i va col·locar aquesta construcció sota un promotor de sobreproducció en llevat. A continuació, vam demostrar que la proteïna Yor1P poli-histiderolat es va produir en forma funcional en el llevat, i després va desenvolupar un mètode per solubilitzar i després purificar aquesta proteïna en un pas per cromatografia d’afinitat en una columna empeltada amb ions metàl·lics. La segona part d’aquest treball consistia a produir-se en forma aïllada al bacteri Escherichia coli i purificar a l’homogeneïtat les dues àrees de Yor1P implicades en el vincle i la hidròlisi d’ATP. Hem estudiat la fixació d’ATP en aquestes dues àrees, que ens va permetre concloure que aquestes àrees estaven ben estructurades. Ara es poden utilitzar per a estudis estructurals. Finalment, ens interessa el paper de la proteïna YCF1P en la desintoxicació de Selenite. Hem observat que la toxicitat de selenita per al llevat es va incrementar considerablement per la presència de compostos tiolats en el medi de cultiu. La formació de derivats reactius d’oxigen és probablement a l’origen d’aquesta hipertoxicitat.

Leave a comment

L'adreça electrònica no es publicarà. Els camps necessaris estan marcats amb *