Gràcies a la tècnica crispr-cas9, els investigadors han aconseguit imposar el genoma siv, l’equivalent al VIH en micos , cèl·lules infectades. Veuen en aquesta prova de concepte un possible tractament definitiu contra la sida.

Això també us interessarà

VIH : El primer cas de curació? Un brasiler diagnosticat fa 8 anys podria ser curat del VIH a la llarga!

1 de desembre és el dia mundial de la sida. Aquest any, el tema destacat és “la solidaritat global i la responsabilitat compartida” que es fa ressò d’una altra pandèmia viral amb la qual hem viscut durant gairebé un any, CVIV-19. Qui estima que 33 milions de persones a tot el món viuen amb el VIH (figura 2019) i que el 68% dels adults i el 53% dels nens infectats segueixen un tractament antiretroviral per a la vida.

Quan el VIH (el virus de la immunodeficiència humana) ) Infecta el cos, conté en el seu sobre i Capside, un genoma fet d’ARN. Però, el virió també incrusta un enzim anomenat transcriptasa inversa. Aquest últim és capaç de retrovar l’ARN viral a l’ADN proviral Simple Strand. També sintetitza la segona cadena de l’ADN proviral, només es troba en la doble cadena que l’ADN proviral pot integrar-se en el genoma de la cèl·lula.

Gràcies a una integrasa, l’ADN proviral s’amaga entre els nostres propis gens, ben protegit del sistema immunitari. Pot quedar-se allà, abans de quedar-se emocionat i reformar virions infeccioses que surten de la conquesta d’altres cèl·lules. El VIH infecta les cel·les que expressen receptors cel·lulars CD4. Les cèl·lules T CD4 + són les que més expressen, però altres poblacions cel·lulars també ho fan, com ara macròfags, cèl·lules dendrítiques i cèl·lules microclials.

Una fotografia de virus d'immunodeficiència humana, responsable de la sida, en microscòpia electrònica de transmissió. © Edwing P. Ewing, CDC'immunodéficience humaine, responsable du Sida, en microscopie électronique à transmission. © Edwing P. Ewing, CDC

Una fotografia del virus de la immunodeficiència humana, responsable de la SIDA, en microscòpia electrònica de transmissió. © Edwing P. EWING, CDC

Procés de les infeccions retrovirals

Teràpies actuals Objectiu proteïnes essencials per a la replicació del virus (transcriptasa inversa) Integry i Protease) i mantenen el seu nivell per sota del llindar de detecció. Per tant, una persona VIH positiva pot viure sense contaminar a altres persones. Però l’ADN proviral està sempre amagat a les cèl·lules i acaba d’extreure’l. SIDA, síndrome d’immunodeficiència adquirida, és l’última etapa de la infecció pel VIH, en la qual el gran nombre de limfòcits TCD4 + destruïts pel virus submergeix el pacient en un estat d’immunosopressió profunda. Per tant, una simple malaltia oportunista pot conduir a la mort.

Veure aussisaida: un descobriment important per al tractament del VIH

per debuscular i desfer-se’n definitivament, de manera que és necessari Utilitzeu eines genètiques. La tècnica genètica més prometedora actualment disponible és CRISPR-CAS9, el desenvolupament del qual de dos investigadors ha estat recompensat pel Premi Nobel de Química el 2020.

Lewis Katz School of Medicine Científics del Temple Universitari de Filadèlfia va utilitzar un Construcció Crispr-Cas9 per exposar l’ADN proviral del SIV, l’equivalent del VIH que infecta els micos, i el model provat per estudiar la forma humana de la infecció dels teixits de Macauques Rhésus. Els resultats d’aquests experiments in vivo es publiquen en comunicacions naturals.

Vídeo que presenta el treball Escola Lewis Katz científics de la Universitat de Filadèlfia Temple. © Temple universitari

El genoma SIV imposit de cèl·lules

Per poder imposar a SIV dels teixits dels rhesus macaces, els científics han utilitzat una complexa construcció de biologia molecular anomenada plataforma. La plataforma inclou l’eina CRISPR-CAS9 construïda per ser específica de l’ADN proviral de la SIV. Aquesta construcció, que pren la forma d’un plasmide, s’integra en un virus associat adeno (o AAV). Els AAV són petits virus d’ADN no patògens utilitzats en teràpia gènica.

Aquesta plataforma ha estat injectada amb tres intravenoses rhesus macaces. Tres setmanes més tard, els científics van recollir la sang i els teixits d’aquests micos després de la seva mort. Els resultats obtinguts d’aquestes mostres es van comparar amb les mateixes mostres recollides d’un mico que no es va tractar amb la plataforma.

S’ha confirmat l’escissió específica de l’ADN proviral del SIV per CRISPR-CAS9 a les cèl·lules sanguínies per als tres micos tractats, a diferència del mico de control. L’eficàcia de l’excisió varia enormement en funció dels animals: 37%, 65% i 92%.

Els científics també han estudiat la biodistribució de la seva plataforma en els òrgans dels micos. Gràcies a una tècnica de PCR millorada, podrien trobar la traça de la plataforma a l’os i la medul·la espinal, les amigdales, el cervell, la melsa, el fetge, els ganglis limfàtics, el timus i el cor. En resum, la plataforma s’ha estès en tot el cos, inclòs el cervell que està protegit per la barrera hematoencefàlica.

En molts d’aquests òrgans, incloent-hi la melsa, els pulmons i els ganglis limfàtics, la capacitat del molecular El cisell per imposar l’ADN demostratiu de la SIV també s’ha demostrat, sense danyar els gens adjacents. Aquests resultats són una prova de concepte per a l’ús de Crispr-CAS9 com a possible estratègia per al tractament del VIH en un model animal.

“Aquest és un desenvolupament important en el que esperem ser el final. VIH / SIDA “, va dir Andrew Maclean, investigador que va participar en aquest treball, en un comunicat de premsa. “El següent pas és avaluar aquest processament durant un període més llarg per determinar si podem aconseguir l’eliminació completa del virus, fins i tot eliminar les assignatures de la teràpia antiretroviral.” Els científics esperen veure el seu tractament un dia. D’un estudi clínic en humans , Després de l’aprovació de l’agència de medicaments i menjar.

Què cal recordar
  • Els investigadors van treballar en el ratolí que produeixen limfòcits humans.
  • Van provar dues teràpies En aquests ratolins infectats pel VIH: edició genòmica (Crispr-Cas9) i antiretrovirals.
  • L’associació d’aquestes dues tècniques elimina l’ADN del VIH.
a Més informació

SIDA: el tractament revolucionari elimina el VIH en animals

Article publicat el 7 de juliol de 2019 per Marie-Céline Ray

L’ADN de la El virus VIH-1 va ser eliminat en el genoma dels animals vius, gràcies a la Genery Edition NOMIC (CRISPR-CAS9), associat a la teràpia antiretroviral. Per a aquest experiment, els investigadors han treballat amb un model de ratolí que produeix cèl·lules T humanes.

Al món, uns 36 milions de persones estan infectades pel VIH-1. Actualment, les teràpies utilitzades per tractar els pacients VIH positius impedeixen que el virus de replicar, però no elimina del cos: les teràpies trítestes no permeten la curació del VIH i han de continuar per tota la vida. La parada antiretroviral reactiva el virus: es replica de nou i és probable que la malaltia evolucioni en la sida. Aquest inici és possible perquè el virus integra el seu ADN al genoma de les cèl·lules immunitàries infectades on roman “dormint” en forma de provirus.

Sabíeu?

Els retrovirus, com el VIH, tenen un genoma en forma d’ARN. Gràcies a l’enzim transcriptasa inversa, l’ARN viral s’utilitza per fer un ADN que s’integra en el genoma de la cèl·lula infectada: és el provirus, que es transcriurà a l’ARN de missatgeria, per produir posteriorment proteïnes virals.

Els antiretrovirals no poden suprimir el provirus del genoma de les cèl·lules. El VIH es manté latent en aquestes cèl·lules dipòsits. Només s’han descrit dos casos de pacients que han eliminat completament el virus: en aquests dos casos particulars, els pacients tenien trasplantaments de cèl·lules mare de sang, a causa dels càncers que van desenvolupar.

Vegeu Aussivih .: Un segon pacient en remissió sostenible

Però seria possible eliminar el provirus amb tisores moleculars, com Crispr-Cas9? És en aquesta pista que dos equips americans treballen a la Universitat del Temple i la Universitat de Nebraska. Aquests investigadors ja havien demostrat que era possible eliminar el virus del VIH de les cèl·lules infectades en alguns òrgans d’animals, utilitzant l’edició genòmica (llegiu el nostre article a continuació).

ADN del Provirus eliminat en cèl·lules vivo

L’originalitat d’aquesta recerca publicada a la revista Nature Communications ha d’associar l’edició genòmica (CRISPR-CAS9) amb antiretrovirals, en aquest cas una teràpia anomenada teràpia anomenada anomenada art làser, o de llarga durada Teràpia antirotroviral eficaç (tractament antiretroviral de llarga durada i llarga durada). Aquest medicament fa que sigui possible mantenir la replicació del virus a un nivell baix i reduir la freqüència a la qual s’administren antiretrovirals. Els medicaments estan embolicats en nanocristalls que alliberen lentament les molècules.

El complex crispr-cas9 permet modificar el genoma de les cèl·lules, tant en animals com en les plantes. © Juan Gärtner, Fotolia

El complex CRISPR CAS9 permet modificar el genoma de les cèl·lules, tant en animals com en les plantes. © Juan Gärtner, Fotolia

Els científics han treballat amb ratolins “humanitzats”, és a dir, modificats per produir limfòcits T humans, que són els objectius del VIH. Una vegada que els ratolins han estat infectats amb el virus, han estat tractats amb antiretrovirals làser, a continuació, amb tisores moleculars Crispr-Cas9.

En gairebé un terç dels ratolins (2/7), tot el VIH L’ADN s’ha eliminat d’aquesta manera. El virus no s’ha detectat a la sang ni en els teixits limfoides, ni en medul·la òssia. D’altra banda, si els investigadors van utilitzar una de les dues tècniques, és a dir, antiretrovirals (10 ratolins) o Crispr-Cas9 (6 ratolins), es va detectar sempre el VIH-1. Només la combinació d’ambdues tècniques funciona.

Aquests resultats prometedors permeten imaginar nous tractaments contra el VIH. “El nostre estudi mostra que els tractaments per suprimir la replicació del VIH i la teràpia de l’edició genòmica, quan s’administren seqüencialment, poden eliminar el VIH des de les cèl·lules infectades i els òrgans d’animals, diu Khamel Khalili, professor de la Universitat del Temple. Ara tenim una manera clara de seguir endavant amb les proves Sobre els primats no humans i possiblement assajos clínics sobre pacients humans en un any. “

Eliminen el virus de la sida en ratolins

Article publicat el 4 de maig de 2017, actualitzat el 24 de març, 2018

Aquest any, la sidacció té lloc des de divendres, 23 de març al diumenge 25 de març. Aquesta convocatòria de donacions té com a objectiu avançar en la lluita contra la sida i, en particular, la investigació. Exemple de resultats recents: el 2017, els investigadors nord-americans van aconseguir suprimir l’ADN de virus a les cèl·lules del ratolí mitjançant l’edició genòmica. L’eliminació d’aquest ADN viral en un model animal obre noves perspectives de recerca en humans.

En l’actualitat, els medicaments del VIH impedeixen que el virus es replica, però segueix sent un tanc latent al cos. Si el pacient deté el tractament, la malaltia pot créixer. El VIH és un retrovirus que integra un ADN (Provirus) al genoma de les cèl·lules hoste. Però les drogues no poden treure-la del genoma de les cèl·lules infectades. L’objectiu d’aquest treball era eliminar aquestes seqüències del VIH mitjançant l’edició genòmica, una tècnica d’enginyeria genètica que modifica el genoma.

En un article publicat en teràpia molecular, els científics descriuen el mètode que utilitzen. Van utilitzar un virus AAV com a vector. Aquesta guia proporcionada RNA associada a la proteïna Cas9 per tallar el provirus del VIH-1 al genoma de cèl·lules infectades. L’eficàcia d’aquest sistema ha estat provada en tres models animals diferents.

L’ADN del provirus s’elimina de les cèl·lules infectades editant el genoma

Eficiència demostrada per primera vegada en cèl·lules transgèniques del ratolí en què es va integrar el genoma del VIH-1. A continuació, els investigadors van utilitzar temes infectats amb el virus Ecohiv (el virus murí equivalent al VIH). Gràcies al seu vector AAV, el genoma viral havia desaparegut en diferents teixits (fetge, pulmons, cervell, melsa). Finalment, els ratolins eren “humanitzats” amb cèl·lules immunitàries humanes i infectades amb el VIH-1. El genoma viral estava absent en melsa, pulmons, cors, còlon i cervell després d’una injecció única de vector intravenós.

Per a investigadors de Temple i Pittsburgh Universitats als Estats Units, aquest mètode d’edició del genoma “ofereix prometedors Tractament per a VIH-SIDA “. El següent pas serà reproduir aquests resultats en primats, abans, possiblement, a considerar assajos clínics en humans.

Interessat en el que acaba de llegir?
Subscriviu-vos al butlletí de notícies: les nostres últimes notícies del dia. Tots els nostres butlletins

enllaços externs

Leave a comment

L'adreça electrònica no es publicarà. Els camps necessaris estan marcats amb *