Resumo: ABC Os transportistas forman unha gran familia de proteínas presentes en todos os organismos vivos. Estas proteínas utilizan a enerxía subministrada pola hidrólise ATP para transportar a través das membranas biolóxicas de sustancias moi variadas. Varias proteínas ABC son importantes para a saúde humana. Por exemplo, o defecto funcional da proteína CFTR causa a mucoscidosis ea superproducción de proteínas MRP1 está asociada aos fenómenos de resistencia aos tratamentos anti-tumores. A levedura Saccharomyces cerevisiae ten unha familia de proteína (YOR1P, YCF1P, BPT1P, YBT1P, VMR1P, NFT1P) relacionada con CFTR e MRP1. Esta familia pode servir como modelo para o estudo das proteínas humanas. A primeira parte deste traballo de tese dedicouse ao estudo bioquímico da proteína de levadura YOR1P. Fusionamos a Yor1 cun fragmento de ADN que codifica un péptido de poli-histidina e colocou esta construción baixo un promotor de sobreproducción de levadura. A continuación, mostrou que a proteína de Yor1P poli-histidilada foi producida en forma funcional na léveda e despois desenvolveu un método para solubilizar e, a continuación, purificando esta proteína nun só paso por cromatografía de afinidade nunha columna enxertada con iones metálicos. A segunda parte deste traballo consistiu en producir en forma illada na bacteria Escherichia Coli e purificar á homoxeneidade as dúas áreas de Yor1P implicadas no vínculo e a hidrólise do ATP. Estudamos o apego de ATP sobre estas dúas áreas, o que nos permitiu concluír que estas áreas estaban ben estructuradas. Agora poden usarse para estudos estruturais. Finalmente, estivemos interesados no papel da proteína YCF1P en desintoxicación de selenita. Observamos que a toxicidade da selenita para a levadura aumentou considerablemente pola presenza de compostos tieolizados no medio da cultura. A formación de derivados reactivos de osíxeno é probablemente a orixe desta hipertoxicidade.

Leave a comment

O teu enderezo electrónico non se publicará Os campos obrigatorios están marcados con *