Rezumat: ABC Carriers formează o mare familie de proteine prezente în toate organismele vii. Aceste proteine utilizează energia furnizată de hidroliza ATP la transport prin membranele biologice ale substanțelor foarte variate. Mai multe proteine ABC sunt importante pentru sănătatea umană. De exemplu, defectul funcțional al proteinei CFTR cauzează mucosidoza și supraproducția de proteină MRP1 este asociată cu fenomenele de rezistență la tratamentele anti-tumorale. Drojdie Saccharomyces cerevisiae are o familie de proteine (YOR1P, YCF1P, BPPT1P, YBT1P, VMR1P, NFT1P) referitoare la CFTR și MRP1. Această familie poate servi ca model pentru studiul proteinelor umane. Prima parte a acestei lucrări de teză a fost dedicată studiului biochimic al proteinei de drojdie YOR1P. Am fuzionat YOR1 cu un fragment de ADN care codifică o peptidă poli-histidină și a plasat această construcție sub un promotor pentru supraproducție în drojdie. Apoi am arătat că proteina YOR1P poli-histianilată a fost produsă în formă funcțională în drojdie și apoi a dezvoltat o metodă de solubilizare și apoi purificarea acestei proteine într-o singură etapă prin cromatografia de afinitate pe o coloană grefată cu ioni metalici. A doua parte a acestei lucrări a constat în producerea în formă izolată în bacteria Escherichia coli și să purificăm omogenitatea celor două zone ale YOR1P implicate în legătura și hidroliza ATP. Am studiat atașamentul ATP pe aceste două zone, ceea ce ne-a permis să concluzionăm că aceste zone erau bine structurate. Acum pot fi utilizați pentru studii structurale. În cele din urmă, am fost interesați de rolul proteinei YCF1P în detoxifierea selenitei. Am observat că toxicitatea selenitei pentru drojdie a fost considerabil mărită prin prezența compușilor tiolizați în mediul de cultură. Formarea derivaților reactivi ai oxigenului este probabil la originea acestei hipertoxicități.

Leave a comment

Adresa ta de email nu va fi publicată. Câmpurile obligatorii sunt marcate cu *